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荧光显微镜及荧光数码成像拍照的选择及注意事项

发布时间:2020-08-10   点击次数:166次

荧光显微镜以及荧光拍(pai)照相机(显微镜相机)

荧(ying)光显微(wei)镜是用(yong)短波长(zhang)的光线照射(she)用(yong)荧(ying)光素染色(se)过的被(bei)检物体,使之受激发后(hou)而产生长(zhang)波长(zhang)的荧(ying)光,然后(hou)观(guan)察。荧(ying)光显微(wei)镜广(guang)泛(fan)应用(yong)于物,医学等领域等

荧光(guang)显微(wei)镜般分(fen)为(wei)透射和(he)落射式两(liang)种类型。

a.透(tou)(tou)射(she)式激发(fa)光(guang)(guang)来自被检物(wu)体的(de)下方,聚光(guang)(guang)镜为暗视野(ye)聚光(guang)(guang)镜,使发(fa)光(guang)(guang)不进(jin)入物(wu)镜,而使荧(ying)光(guang)(guang)进(jin)入物(wu)镜。它在低倍情(qing)况下明(ming)亮,而高怕仅暗,在注漫和淘(tao)中时,较谁操作,尤以低倍的(de)照明(ming)被围准于确定(ding),但能(neng)得到很(hen)暗的(de)视野(ye)背景(jing)。透(tou)(tou)射(she)式不使用于非透(tou)(tou)明(ming)的(de)被检物(wu)体。

b.落射(she)(she)式目(mu)前(qian)几(ji)乎被(bei)淘汰(tai),新(xin)型(xing)的(de)荧(ying)光(guang)显微统多为落射(she)(she)式,光(guang)源来自(zi)被(bei)检动依的(de)上(shang)方,在光(guang)路中具有分光(guang)镜(jing),所以对透(tou)明(ming)和不适明(ming)的(de)被(bei)检物(wu)休体都(dou)适用(yong)。由于物(wu)确起了(le)聚光(guang)接的(de)作用(yong),不仅便于操作,而且从低倍到高倍,可以实(shi)现整个视场(chang)的(de)均匀(yun)照明(ming)。

(2)荧光镜(jing)检术的注意事项

a.激发(fa)光长时(shi)间的(de)照射,会发(fa)生光的(de)衰减和(he)淬灭现象,因此尽可能缩短观察时(shi)间,暂(zan)时(shi)不观察时(shi),应用挡板遮盖发(fa)光。

b.作油(you)镜(jing)(jing)观察时,应用无荧光(guang)镜(jing)(jing)油(you)"

c.做(zuo)荧光(guang)实验,普遍荧光(guang)比较(jiao)弱,应在较(jiao)暗(an)的室内进行。电源可装稳压器,否则电压不稳不仅会(hui)(hui)降低(di)汞灯的寿(shou)命,也(ye)会(hui)(hui)影响效果,目(mu)前新研究领域都会(hui)用到(dao)荧(ying)光显微镜,如基因原(yuan)位(wei)杂交FISH)等。

荧(ying)光拍摄(she)通常需要使(shi)用(yong)制冷型CCD(成像系统相机),因(yin)为制冷CCD可以减少(shao)背景噪声,对弱(ruo)荧光信号采(cai)(cai)集(ji)很有好(hao)处,特别(bie)是(shi)像单(dan)分子成像。采(cai)(cai)集(ji)强光信号不一(yi)定(ding)要用制冷CCD,可使用黑白相机,彩色相机不适(shi)合(he)荧光(guang)采(cai)集,因为(wei)其感光(guang)度低、分辨率也(ye)低,除非荧光(guang)信号很高,对分辩率要求不高或者使用双通道滤色片时才适(shi)合(he)用彩色相机。

荧(ying)光(guang)显微(wei)镜可(ke)以用启步(bu)BM1000Z 2000Z  BM4000D BM3000D,进口可(ke)使用奥(ao)林巴(ba)斯BX53BX43、CKX53。尼康(kang)NI、CI系列等(deng)都可以,相机也可以用我公司的BSW-CD-16 BSW-CD-630 BSW-CD-230等都是不错的选择(ze)。


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